頂空-氣相色譜法測定血液中酒精含量

摘 要：以叔丁醇為內標，采用頂空-氣相色譜法對血液中的酒精含量進行分析。該方法在5~160mg/100mL濃度范圍內線性良好，回收率在90%~110%之間，方法的檢出限為0.38 mg/100mL。

關鍵詞：頂空-氣相色譜法 血液 乙醇

2008年世界衛生組織的事故調查顯示，大約50%~60%的交通事故與酒后駕駛有關，酒后駕駛已經被列為車禍致死的主要原因。在中國，每年由于酒后駕車引發的交通事故達數萬起；而造成死亡的事故中 50%以上都與酒后駕車有關，酒后駕車的危害觸目驚心，已經成為交通事故的第一大“殺手”。根據國家質量監督檢驗檢疫局發布的《車輛駕駛人員血液、呼氣酒精含量閾值與檢驗》(GB19522—2004)中規定，駕駛人員每血液酒精含量大于等于 20 mg/100mL小于 80 mg/100mL 為酒后駕車；血液酒精含量大于或等于 80 mg/100mL 為醉酒駕車。

飲酒以后,酒精進入胃腸壁，被迅速吸收溶解于血液中，5分鐘后即可在血液中檢出酒精。酒精對人體有麻醉作用，使中樞神經活動逐漸變得遲鈍，并延及背髓神經，造成頭腦不清。 目前，歐美國家多使用紅外線型呼氣檢測儀進行酒后駕車篩查。上海市于1998年開始使用呼氣式酒精檢測儀，上海市交警總隊查處的酒后駕車案件大為增加。與血液酒精檢測相比，呼氣酒精檢測有易被受檢人接受、操作簡單等特點，但也有很多因素影響檢測結果的可靠性，結果不是很準確。 相比較呼氣檢測而言，頂空-氣相色譜法作為酒后駕車的分析方法更為準確，是醉酒駕車判決依據。目前，我國交警部門在執法過程中，如果交警發現司機有酒后駕車的嫌疑，首先會呼氣式酒精測試儀進行檢測；當呼氣檢測結果達到或者超過醉酒駕駛標準時，就近送司機去醫院進行抽血取樣，血樣再送至司法鑒定中心或相關部門實驗室使用頂空-氣相色譜法進行檢測。

其實，頂空-氣相色譜法的最早應用就是1964報道的測定血液中的乙醇濃度，經過多次改進后，這一方法已為世界各國所普遍采用，用來測試酒后駕車司機血液中的乙醇濃度。該方法分離效率高，檢測靈敏度高；另外該方法還具有分析速度快(一般在3～4min就可以完成一個樣品分析)、準確度較高、精密度高等顯著優點。 鑒于頂空-氣相色譜法具有以上特點，2009年，公安部發布了GA/T 842-2009 《血樣酒精含量的檢驗方法》檢測標準。該方法以叔丁醇為內標，頂空-氣相色譜法分析血液中的酒精含量。

本文參照公安部 GA/T842-2009 標準，以叔丁醇為內標，頂空-氣相色譜法分析血液中的酒精含量。該方法準確可靠，重復性好。

1．實驗部分

1.1 儀器與試劑

島津 GC-2010 Plus氣相色譜儀，配FID檢測器，頂空進樣器（DANI HSS-86.50）

1.2 分析條件

1.2.1 色譜條件

色譜柱：Stabilwax，30 m×0.25 mm×0.25 μm

進樣口溫度：200℃

柱溫程序：70℃(4 min) 20℃/ min 150℃(1 min)

柱流量：1.2 mL/min

進樣方式：分流

分流比：5:1

檢測器溫度：230℃

氫氣流量：40 mL/min

空氣流量：400 mL/min

尾吹氣流量：30 mL/min

1.2.2 頂空條件

平衡溫度：70℃

平衡時間：15 min

定量環溫度：105℃

傳輸線溫度：110℃

1.3 樣品制備

用移液槍移取 0.50 mL 待測血液樣品于頂空瓶中，加入 0.1 mL 叔丁醇水溶液（200mg/100mL）作為內標，密封后待測試。

2. 結果討論

2.1 乙醇和叔丁醇的色譜圖

圖1 以血液為基質的乙醇和叔丁醇色譜圖（濃度80 mg/100mL）

2.2 標準曲線

用移液槍移取 0.5 mL 空白血液樣品于頂空瓶中，加入一定量的乙醇水溶液，得到5、20、 40、80、160 mg/100mL 標準系列濃度，再分別添加0.1mL 叔丁醇水溶液（200mg/100mL）作為內標。頂空進樣，得到標準曲線見圖2，相關系數為0.9995。

2.3 回收率測試及檢出限

用移液槍移取0.5mL空白血液樣品于頂空瓶中，加入一定量濃度為1000mg/100mL乙醇水溶液，加標濃度分別為 5、20、80mg/100mL，每種濃度取三份平行樣。再分別添加0.1mL 叔丁醇水溶液（200mg/100mL）作為內標。按照上述前處理步驟進行回收率測試，結果見下表1。